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【柏恒科技小課堂】qPCR反應漫談(續)
發布時間:2026-01-04
在上一期的qPCR反應漫談中,從一開始沃森和克里克兩位基因學奠基人的兩個論點簡單延伸至染料法和探針法兩類常見的qPCR反應。這一期做一個從PCR反應過程出發到一些實驗問題優化的分享。01(先拋磚)PCR反應原理:PCR通過變性、退火和延伸三個步驟的循環往復,模擬DNA在體外擴增的...
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2022
3-1
三槽梯度PCR儀科普知識大全,你真不一定都懂
三槽梯度PCR儀溫度的準確性可能會對PCR的成敗與否起決定性作用,因為PCR的三個主要步驟都依賴于溫度。類似地,加熱模塊上孔與孔之間的溫度一致性對于獲取可靠而可重復的PCR結果也是至關重要的。因此,所使用的PCR儀能在模塊之間準確到達設定的...
2022
1-21
雙槽梯度PCR儀應該這樣使用
雙槽梯度PCR儀的反應原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性一退火(復性)--延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至94℃左右一定時聚合酶鏈式反應間后,使模板DN...
2022
1-17
熒光定量基因擴增儀使用必須遵守下面的基本安全措施
熒光定量基因擴增儀在操作、維護和修理本儀器的所有階段,都必須遵守下面的基本安全措施。如果不遵守這些措施或本說明書其它地方指出的警告,便可能影響到儀器提供的保護。同時,這也會破壞設計和制造的安全標準以及儀器的預期使用范圍。a)儀器接地為了避免...
2022
1-11
熒光定量PCR的理論依據是什么?
熒光定量PCR在反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光強度信號,這樣就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化。從而得到一條熒光擴增曲線。熒光擴增曲線...
2022
1-4
二維梯度PCR的應用領域有哪些?
PCR技術從發明至今已有二十多年的時間,用于PCR實驗的儀器不斷的推陳出新。然而PCR的基本過程沒有太大變化,包括變性-退火-延伸這三步。這其中包括反應條件、使用試劑的量甚至是引物等,很多研究者在進行PCR優化時都會考慮退火溫度的優化,這時...
2021
12-27
實時熒光定量PCR儀保養及維護方法
高分辨率溶解(HRM)作為一種聯管式的PCR后分析技術,引起了學術界的廣泛關注。HRM基于DNA雙鏈的溶解特性對PCR產物進行分析,與傳統的溶解曲線分析類似,但提高更多的信息,因而具有更廣泛的應用。可根據PCR產物的序列、長度、GC含量或鏈...
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